雙光束紫外分光光度計(jì)作為精密光學(xué)分析儀器，其操作安全涉及人員防護(hù)、設(shè)備保護(hù)及實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性三方面。以下從操作前準(zhǔn)備、運(yùn)行中規(guī)范、應(yīng)急處理及維護(hù)保養(yǎng)四個(gè)階段，系統(tǒng)闡述安全操作要點(diǎn)：
 

　　一、雙光束紫外分光光度計(jì)操作前的安全準(zhǔn)備
 

　　1.環(huán)境檢查與設(shè)備安置
 

　　溫濕度控制：確保實(shí)驗(yàn)室溫度在15-30℃(理想值25℃)，濕度≤65%。濕度過(guò)高易導(dǎo)致電路板短路，溫度波動(dòng)過(guò)大影響光路穩(wěn)定性。
 

　　通風(fēng)要求：儀器后方與頂部預(yù)留至少30cm空間，避免排風(fēng)受阻。若分析揮發(fā)性樣品(如有機(jī)溶劑)，需在通風(fēng)櫥內(nèi)操作，防止有毒氣體聚集。
 

　　防震措施：將儀器放置于獨(dú)立實(shí)驗(yàn)臺(tái)，遠(yuǎn)離振動(dòng)源(如離心機(jī)、振蕩器)。振動(dòng)會(huì)導(dǎo)致光柵偏移，影響波長(zhǎng)精度。
 

　　2.電源與接地檢查
 

　　電壓穩(wěn)定性：使用穩(wěn)壓電源(如UPS)，確保輸入電壓在220V±5%范圍內(nèi)。電壓波動(dòng)可能損壞光電倍增管(PMT)等敏感元件。
 

　　接地保護(hù)：檢查接地線是否牢固連接(接地電阻≤4Ω)，避免漏電風(fēng)險(xiǎn)。靜電積累可能干擾電子信號(hào)，導(dǎo)致基線漂移。
 

　　3.樣品與試劑預(yù)處理
 

　　樣品澄清度：過(guò)濾或離心去除懸浮顆粒(如粒徑>2μm)，防止散射光干擾吸光度測(cè)量。
 

　　試劑純度：使用光譜級(jí)溶劑(如HPLC級(jí)甲醇)，避免雜質(zhì)吸收峰掩蓋樣品信號(hào)。
 

　　腐蝕性樣品：若分析強(qiáng)酸(如濃硫酸)或強(qiáng)堿(如NaOH)，需使用耐腐蝕比色皿(如石英或聚四氟乙烯材質(zhì))，并縮短測(cè)量時(shí)間以減少儀器腐蝕。
 

　　4.個(gè)人防護(hù)裝備(PPE)
 

　　基礎(chǔ)防護(hù)：佩戴實(shí)驗(yàn)服、防化學(xué)手套(如丁腈手套)及護(hù)目鏡，防止試劑接觸皮膚或眼睛。
 

　　激光防護(hù)：若儀器配備氘燈(發(fā)射紫外光)，操作時(shí)避免直視光源，必要時(shí)佩戴UV防護(hù)眼鏡(波長(zhǎng)范圍200-400nm)。

 

　　二、雙光束紫外分光光度計(jì)運(yùn)行中的安全操作規(guī)范
 

　　1.開(kāi)機(jī)自檢與預(yù)熱
 

　　自檢流程：接通電源后，等待儀器完成自檢(通常需5-10分鐘)，確認(rèn)無(wú)報(bào)警代碼。
 

　　預(yù)熱時(shí)間：氘燈需預(yù)熱30分鐘以上，鎢燈需預(yù)熱15分鐘，以達(dá)到穩(wěn)定發(fā)光強(qiáng)度。未充分預(yù)熱會(huì)導(dǎo)致基線噪聲增大。
 

　　2.波長(zhǎng)與模式設(shè)置
 

　　波長(zhǎng)校準(zhǔn)：每月使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(如鈥玻璃濾光片)校準(zhǔn)波長(zhǎng)，確保誤差≤±0.5nm。錯(cuò)誤波長(zhǎng)設(shè)置可能損壞檢測(cè)器(如PMT在短波長(zhǎng)下易老化)。
 

　　模式選擇：
 

　　吸收模式：常規(guī)分析使用，注意設(shè)置合適的波長(zhǎng)范圍(如DNA分析選260nm，蛋白質(zhì)選280nm)。
 

　　熒光模式(若配備)：需關(guān)閉樣品室門，防止激發(fā)光泄漏傷害眼睛。
 

　　掃描模式：設(shè)置合理的掃描速度(如中速120nm/min)和狹縫寬度(通常2nm)，避免高速掃描導(dǎo)致光路過(guò)熱。
 

　　3.樣品測(cè)量操作
 

　　比色皿裝載：
 

　　手持比色皿毛面(避免指紋污染光面)，用鏡頭紙輕拭光面后插入樣品室。
 

　　石英比色皿用于紫外區(qū)(200-400nm)，玻璃比色皿僅用于可見(jiàn)區(qū)(400-800nm)，誤用會(huì)導(dǎo)致吸光度異常。
 

　　基線校正：以空白溶劑(如純水)調(diào)零，確保基線平穩(wěn)(噪聲≤±0.001Abs)。基線波動(dòng)大可能由光源不穩(wěn)定或光路污染引起。
 

　　吸光度范圍：控制樣品吸光度在0.1-1.0Abs之間(理想值0.4-0.8Abs)。吸光度過(guò)高(>1.5Abs)需稀釋樣品，否則檢測(cè)器易飽和；過(guò)低(<0.05Abs)則信號(hào)信噪比差。